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NAD激酶(NADK)測試盒

簡(jiǎn)要描述:

NAD激酶(NADK)測試盒廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養細胞中,是目前所發(fā)現的生物體內惟一能夠催化NAD+磷酸化生成NADP+的酶,可催化NAD(H)以ATP或無(wú)機多聚磷酸[poly(P)]作為磷酰基供體進(jìn)行磷酸化反應,生成NADP(H)。

更新時(shí)間:2024-04-10;廠(chǎng)商性質(zhì):經(jīng)銷(xiāo)商;覽量:711

商品屬性:

貨號

規格

檢測方法

YSH3230

100管/48樣

微量法

YSH3230-1

50管/24樣

可見(jiàn)分光光度法


商品詳情:
NAD激酶(NADK)測試盒測定意義:

NADK(EC 2.7.1.23)廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養細胞中,是目前所發(fā)現的生物體內惟一能夠催化NAD+磷酸化生成NADP+的酶,可催化NAD(H)以ATP或無(wú)機多聚磷酸[poly(P)]作為磷酰基供體進(jìn)行磷酸化反應,生成NADP(H)。因此,NAD激酶在合成NADP(H)以及調節NAD(H)與NADP(H)的平衡上具有重要作用。

測定原理:

NADK催化NAD+磷酸化,生成NADP+;NADP+可被6-磷酸葡萄糖脫氫酶還原為NADPH;NADPH通過(guò)PMS的遞氫作用,還原氧化型噻唑藍(MTT),通過(guò)在600 nm下測定MTT的還原速度(吸光值的變化)可反映出NADK活性的大小。

需自備的儀器和用品:

可見(jiàn)分光光度計/酶標儀、恒溫水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、微量石英比色皿/96孔板和蒸餾水。
試劑組成和配制:

試劑一:液體×1瓶,4℃保存。

試劑二:液體×1瓶,4℃保存。

試劑三:粉劑×1瓶(棕色),4℃避光保存。臨用前加入667μL無(wú)水乙醇,蓋緊后充分混勻,再加入9.333 mL蒸餾水混勻,避光保存。

試劑四:粉劑×1管,4℃避光保存。臨用前加1 mL蒸餾水,充分溶解。

標準品:粉劑×1瓶,臨用前加10 mL蒸餾水,充分溶解。1μmol/mL標準液,4℃避光保存。


測定操作:

1. 分光光度計/酶標儀預熱30 min,調節波長(cháng)到570 nm,蒸餾水調零。

2. 空白管:取EP管,加入10μL蒸餾水,100μL試劑二,100μL試劑三和10μL試劑四,混勻后蓋緊瓶蓋(防止水分散失),置于沸水浴中保溫15 min,冷卻后反復顛倒EP管數次,于570nm測定吸光值,記為A空白管。顯色后務(wù)必在30min內測完。

3. 標準管:取EP管,加入10μL標準品,100μL試劑二,100μL試劑三和10μL試劑四,混勻后蓋緊瓶蓋(防止水分散失),置于沸水浴中保溫15 min,冷卻后反復顛倒EP管數次,于570nm測定吸光值,記為A標準管。顯色后務(wù)必在30min內測完。

4. 測定管:取EP管,加入10μL上清液,100μL試劑二,100μL試劑三和10μL試劑四,混勻后蓋緊瓶蓋(防止水分散失),置于沸水浴中保溫15 min,冷卻后反復顛倒EP管數次,于570nm測定吸光值,記為A測定管。顯色后務(wù)必在30min內測完。

注意:空白管和標準管只需要測定一次。

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