【包裝規格】60份/盒 共180張
【預期用途】用于大腸菌群的檢測
【檢驗原理】應用滅菌的濾紙吸收選擇性培養基,細菌通過(guò)濾紙纖維膨脹而被固定并生長(cháng)繁殖,大腸菌群在發(fā)育時(shí)伴隨產(chǎn)生琥珀酸脫氫酶將紙片上的TTC(紅四碳唑)還原成不可逆的Formazane產(chǎn)生紅色色素,即大腸菌在紙片培養上呈紅菌落,菌落周?chē)a(chǎn)生黃圈是大腸菌分解乳糖產(chǎn)酸使指示劑變色的結果。
【儲存條件及有效期】2℃~8℃保存 有效期12個(gè)月
【標本處理】
1、樣品處理:液體樣品按國標方法進(jìn)行;固體樣品,取25g樣品,研碎加入25ml滅菌鹽水混勻。
2、接種:液體樣品吸取三個(gè)1mL分別涂布于三疑于三張紙片,再吸取1︰10、1︰100稀釋液各三個(gè)1ml,分別涂布于三張紙片。固體樣品,吸取1︰1混懸液三個(gè)1mL(1g)分別涂布于三張紙片,再吸取1︰10、1︰100稀釋液各三個(gè)1ml,分別涂布于三張紙片,而后用手輕輕壓平,置36±1℃溫箱,培養15小時(shí)觀(guān)察結果。
【檢驗方法】將接種好的紙片,袋口朝上,豎直放置于37℃培養箱中培養12~18小時(shí)。
【結果判斷】
1、 紙片上出現紫紅色菌落,其周?chē)悬S圈者為陽(yáng)性。
2、 紙片為一種顏色,無(wú)菌落生長(cháng)者為陰性。
3、 紙片呈紫色,有紫紅色菌落,其周?chē)鸁o(wú)黃圈者為陰性。
4、 酸性食品接種后,紙片變黃,經(jīng)培養后無(wú)紫紅色菌落為陰性。
5、 紙片變色呈現不典型菌落,結果可疑者,應做復發(fā)酵進(jìn)驗證。
【結果報告】根據紙片的陽(yáng)性片數,查對大腸菌群MPN檢索表,報告之。
【注意事項】
1、應避光低溫(10℃以下)保存,并注意防潮,如發(fā)現紙片變?yōu)榉奂t色即為失效。
2、檢查酸性食品時(shí),需用10%無(wú)菌碳酸鈉溶液調PH至中性后,再檢測。
3、可疑結果的判斷:
大腸菌群量的多少與結果的顯示密切相關(guān),可出現3種不同現象:⑴菌量較大(≥103cfu/ml),整個(gè)紙片變黃而又無(wú)紅色斑點(diǎn)(或紅暈);⑵菌量適中(102~103 cfu/ml),整個(gè)紙片也變黃,但有小而密集的紅色斑點(diǎn);⑶菌量較少(≤102cfu/ml),紙片可呈紫藍色,并有散在或較密集的紅色斑點(diǎn),其周?chē)凕S。因此菌量較大時(shí),可能出現可疑現象。此時(shí)應通過(guò)加大樣品稀釋度或進(jìn)一步做復發(fā)酵進(jìn)行證實(shí)。其它可疑現象也可通過(guò)發(fā)酵實(shí)驗進(jìn)行確認。
4、 確認試驗的方法:進(jìn)行確認試驗,用滅菌攝子無(wú)菌操作將可疑紙片移種到乳糖發(fā)酵管里,置37℃24小時(shí)培養后,對其產(chǎn)酸產(chǎn)氣者判為大腸菌群陽(yáng)性,否則判為陰性。